IVT mRNA 및 LNP 제조
VectorBuilder는 IVT mRNA 제조 및 LNP (lipid nanoparticle) 치료제 개발을 위한 광범위한 CRO 및 CDMO 서비스를 제공합니다. 혁신적인 벡터 디자인 플랫폼과 광범위한 경험을 바탕으로 최적의 in vitro transcription 벡터 디자인, 대용량 IVT mRNA 제조, LNP encapsulation이 가능하고, 광범위한 연구 및 임상 요구에 맞는 철저한 품질 관리를 제공할 수 있습니다. 신약 탐색 연구 및 전임상 연구를 포함하여 다양한 다운스트림 요구사항을 충족하는 여러 등급의 서비스를 제공합니다.
IVT mRNA의 생산 워크플로우
제공되는 IVT mRNA 등급
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Research-grade mRNA
Research-grade mRNA는 기초 연구와 신약 탐색 연구에 적합합니다. 모든 다운스트림 연구 요구사항에 적합한 고품질을 보장하기 위해 엄격한 QC로 표준화된 실험실 조건에서 제작됩니다.
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GMP-like mRNA
GMP-like mRNA는 약물 안전성 및 대사에 대한 동물 실험과 같은 전임상 연구를 위한 것입니다. 이는 유사한 생산 공정 및 유사한 품질 특성을 포함하여 GMP 가이드라인의 주요 특징을 채택하는 방식으로 생산됩니다. 생산은 문서 통제 및 추적성을 갖춘 분리된 생산시설에서 수행됩니다. 따라서 GMP-like 등급은 최종 GMP 제품의 소규모 모방으로 볼 수 있지만 비용은 훨씬 저렴하고 일정은 더 빠릅니다. 해당되는 경우, GMP-like mRNA는 RNase가 없는 제조 및 정제 조건에서 생산될 수 있습니다. 제품 출하 시 COA가 제공됩니다. TSE/BSE statement는 요청 시 제공됩니다.
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GMP-grade mRNA Coming soon
GMP-grade mRNA는 GMP 가이드라인을 엄격하게 준수하여 인증된 GMP 제품군에서 생산되며, 생산 공정 전반에 걸쳐 포괄적인 품질 보증 시스템이 구현됩니다. mRNA가 원하는 품질 및 안전성 표준을 충족하는지 확인하기 위해 광범위한 in-process와 release QC assay가 수행됩니다. 제품 출하 시 생산 프로세스와 COA를 완벽하게 문서화한 batch release report가 제공됩니다. 요청 시 기타 문서도 제공 가능합니다.
다양한 등급의 IVT mRNA 비교
| Research-grade | GMP-like | |
|---|---|---|
| Applications | Basic research, drug discovery, and preclinical studies | Preclinical studies such as animal testing of drug safety and metabolism |
| Production scales | mRNA: 0.1-10 mg LNP: 0.1-3 mg |
mRNA: 0.01-5 g LNP: 3-20 mg |
| Turnaround time | 49-71 days ‧ Vector design & cloning: 26-36 days ‧ Plasmid production & linearization: 14-21 days ‧ IVT mRNA production: 14-21 days ‧ LNP encapsulation: 9-14 days |
59-90 days ‧ Vector design & cloning: 31-41 days ‧ Plasmid production & linearization: 14-28 days ‧ IVT mRNA production: 14-28 days ‧ LNP encapsulation: 14-21 days |
| Quality system | ISO9001 | ISO9001 while adopting key features of GMP system |
| Production facility | In parallel production in shared laboratory space | Productions done in segregated suites |
| Document control and traceability | No | Yes |
| QC and release | Standard QC | Performed on a case-by-case basis depending on individual project needs (see below) |
| Aseptic fill/finish | N/A | Available upon request |
| Storage of retention sample | Available upon request | Available upon request |
| Other deliverable | COA | 1. COA 2. Manufacturing summary 3. TSE/BSE statement upon request |
LNP (Lipid Nanoparticle) Encapsulation
VectorBuilder는 lipid nanoparticle 혼합을 위한 전체 장비 제품군을 보유하고 있으며 철저한 품질관리를 거쳐 제조됩니다. VectorBuilder의 생산 시설은 고객맞춤형 lipid formulation를 수용할 수 있고, 최첨단 장비를 사용하여 microfluidic mixing, dilution, buffer exchange, sterile filtration 및 fill/finish를 수행할 수 있습니다.
Figure 1. LNP-mRNA의 대표적인 QC 결과.
(A) 입자의 움직임으로 인해 변동하는 빛의 강도 차이를 측정하는 dynamic light scattering (DLS)을 통해 입자 사이즈를 결정했습니다. Polydispersity index (PDI)는 입자 사이즈에 대한 샘플의 heterogeneity를 반영합니다. (B) Zeta potential는 LNP의 안정성을 반영합니다. 샘플의 Zeta potential은 -1.872 mV에서 +1.872 mV 사이입니다.
Quality Control Assays
| Product | Attribute | Analytical Assay |
|---|---|---|
| IVT DNA template | Concentration | Spectrometry |
| Identity | Gel electrophoresis, Sanger sequencing | |
| Linearization | Capillary gel electrophoresis | |
| Residual host E. coli DNA | qPCR | |
| mRNA | Concentration | UV-Vis spectrometry |
| Identity | Capillary gel electrophoresis, reverse transcription followed by Sanger sequencing | |
| Capping efficiency | LC-MS, Capillary gel electrophoresis | |
| PolyA tail integrity | LC-MS, Capillary gel electrophoresis | |
| Residual protein | NanoOrange assay | |
| Residual plasmid | qPCR | |
| dsRNA | Dot blot | |
| Endotoxin | Kinetic chromogenic assay (KCA) | |
| LNP | Endotoxin | Kinetic chromogenic assay (KCA) |
| Encapsulation efficiency | RiboGreen assay | |
| Diameter, PDI, and Zeta potential | Zetasizer |
추가 제공사항
VectorBuilder는 mRNA 외에도 CRISPR 유전자 편집과 self-amplifying mRNA(saRNA)를 위한 IVT Cas9 mRNA와 sgRNA를 제공합니다. LNP formulation은 IVT mRNA, siRNA 및 plasmid DNA를 encapsulation하여 다양한 유전자 전달 방법을 가능하게 합니다.