IVT RNA 및 LNP 제조

VectorBuilder는 IVT (in vitro transcription) mRNA 제조 및 LNP (lipid nanoparticle) 치료제 개발을 위한 광범위한 CRO 및 CDMO 서비스를 제공합니다. 혁신적인 벡터 디자인 플랫폼과 폭넓은 경험을 바탕으로 최적의 in vitro transcription 벡터 디자인, 대량 IVT mRNA 제조, LNP encapsulation에 이어 기초연구 및 임상 요구에 맞는 철저한 품질관리를 제공할 수 있습니다. VectorBuilder는 신약개발 연구 및 전임상 연구를 포함하여 다양한 다운스트림 요구사항을 충족하는 여러 등급의 IVT RNA를 제공합니다.

IVT mRNA 생산을 위한 워크플로우

제공되는 IVT mRNA 등급

  • Research-grade mRNA

    Research-grade mRNA는 기초연구 및 신약개발 연구를 위한 것입니다. 모든 다운스트림 기초연구 요구사항에 적합한 고품질을 보장하기 위해 엄격한 QC를 갖춘 표준 실험실 조건에서 제작되었습니다.

    Learn more about our research-grade mRNA

  • GMP-like mRNA

    GMP-like mRNA는 약물 안전성 및 대사에 대한 동물 실험과 같은 전임상 연구를 위한 것입니다. 이는 GMP 가이드라인의 주요 특징을 채택하는 방식으로 생산되며, 유사한 생산 공정 및 유사한 품질 특성을 포함합니다. 생산은 문서 통제 및 추적성을 갖춘 분리된 생산 시설에서 수행됩니다. 따라서 GMP-like 등급은 최종 GMP 생산의 소규모 모의 생산으로 볼 수 있지만 비용은 훨씬 저렴하고 일정은 더 빠릅니다. 만일 필요하다면, GMP-like mRNA는 RNase-free 발효 및 정제 조건에서 생산될 수 있습니다. 생산 완료 후 COA가 제공되며, TSE/BSE statement는 별도 요청시 제공됩니다.

  • GMP-grade mRNA Coming soon

    GMP-grade mRNA는 GMP 가이드라인을 엄격히 준수하여 인증된 GMP 시설에서 생산됩니다. 생산 공정 전반에 걸쳐 종합적인 품질 보증 시스템이 구현됩니다. mRNA가 원하는 품질 및 안전 표준을 충족하는지 확인하기 위해 광범위한 in-process 및 release QC 분석이 수행됩니다. 제품 출시 시 생산 프로세스와 COA를 완벽하게 문서화한 batch release report가 제공됩니다. 별도 요청 시 기타 문서도 제공 가능합니다.

다양한 등급의 IVT mRNA 비교

Research-grade  GMP-like 
Applications Basic research, drug discovery, and preclinical studies Preclinical studies such as animal testing of drug safety and metabolism
Production scales mRNA: 0.1-10 mg
LNP: 0.1-3 mg		 mRNA: 0.01-20 g
LNP: 3-20 mg
Turnaround time 49-71 days
‧ Vector design & cloning: 26-36 days
‧ Plasmid production & linearization: 14-21 days
‧ IVT mRNA production: 14-21 days
‧ LNP encapsulation: 9-14 days		 59-90 days
‧ Vector design & cloning: 31-41 days
‧ Plasmid production & linearization: 14-28 days
‧ IVT mRNA production: 14-28 days
‧ LNP encapsulation: 14-21 days
Quality system ISO9001 ISO9001 while adopting key features of GMP system
Production facility In parallel production in shared laboratory space Productions done in segregated suites
Document control and traceability No Yes
QC and release Standard QC Performed on a case-by-case basis depending on individual project needs (see below)
Aseptic fill/finish N/A Available upon request
Storage of retention sample Available upon request Available upon request
Other deliverable COA 1. COA
2. Manufacturing summary
3. TSE/BSE statement upon request

LNP Encapsulation

VectorBuilder는 lipid nanoparticle 혼합 및 제조와 철저한 품질관리를 위한 전체 장비 제품군을 보유하고 있습니다. VectorBuilder의 생산 시설은 커스텀 lipid formulation을 제공하고 최첨단 장비를 사용하여 microfluidic mixing, dilution, buffer exchange, sterile filtration 및 fill/finish를 수행할 수 있습니다.

Figure 1. Representative QC results of LNP-mRNA.

(A) Particle size was determined by dynamic light scattering (DLS) which measures the intensity differences of fluctuated light due to motion of particles. The polydispersity index (PDI) reflects the heterogeneity of a sample on particle size. (B) Zeta potential reflects the stability of LNP. The Zeta potential of the sample is between -1.872 mV and +1.872 mV.

품질관리 분석

Product Attribute QC Assay
IVT DNA template Concentration Spectrometry
Identity Gel electrophoresis, Sanger sequencing
Linearization Capillary gel electrophoresis
Residual host E. coli DNA qPCR
mRNA Concentration UV-Vis spectrometry
Identity Capillary gel electrophoresis, reverse transcription followed by Sanger sequencing
Capping efficiency LC-MS, Capillary gel electrophoresis
PolyA tail integrity LC-MS, Capillary gel electrophoresis
Residual protein NanoOrange assay
Residual plasmid qPCR
dsRNA Dot blot
Endotoxin Kinetic chromogenic assay (KCA)
LNP Endotoxin Kinetic chromogenic assay (KCA)
Encapsulation efficiency RiboGreen assay
Diameter, PDI, and Zeta potential Zetasizer

추가 제공 사항

VectorBuilder는 mRNA 외에도 CRISPR 유전자 편집을 위한 IVT Cas9 mRNA 및 sgRNA 뿐만 아니라 self-amplifying mRNA (saRNA)를 제공합니다. LNP formulation은 IVT mRNA 분자, siRNA 및 plasmid DNA를 encapsulation하는데 사용되어 다양한 유전자 전달 방법이 가능합니다.

문서 자료

브로셔 & 리플렛
주요 인용 논문
Phase Separation Enhanced PROTAC for Highly Efficient Protein Degradation
Yu, et al.
Biomacromolecules, 2024, doi: 10.1021/acs.biomac.4c00424
Products used:
Abstract: Biomacromolecular condensates formed via phase separation establish compartments for the enrichment of specific compositions, which is also used as a biological tool to enhance molecule condensation, thereby increasing the efficiency of biological processes. Proteolysis-targeting chimeras (PROTACs) have been developed as powerful tools for targeted protein degradation in cells, offering a promising approach for therapies for different diseases. Herein, we introduce an intrinsically disordered region in the PROTAC (denoted PSETAC), which led to the formation of droplets of target proteins in the cells and increased degradation efficiency compared with PROTAC without phase separation. Further, using a nucleus targeting intrinsically disordered domain, the PSETAC was able to target and degrade nuclear-located proteins. Finally, we demonstrated intracellular delivery of PSETAC using lipid nanoparticle-encapsulated mRNA (mRNA-LNP) for the degradation of the endogenous target protein. This study established the PSETAC mRNA-LNP method as a potentially translatable, safe therapeutic strategy for the development of clinical applications based on PROTAC.
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