Overexpression Stable Cell Line

VectorBuilder는 GOI를 안정적으로 과발현하도록 세포주를 조작하여 transient transfection과 관련된 변동을 극복하는데 도움을 줍니다. Gene overexpression 세포주는 렌티바이러스 transduction 이후에 antibiotic selection에 의해 생성됩니다. GOI 발현 수준은 RT-qPCR에 의해 검증됩니다. 또한, 최종 세포주 제품을 출시하기 전에 무균 테스트, mycoplasma 검출 등 일련의 표준 QC 분석을 수행합니다. 별도 요청시 Western blot 및 immunocytochemistry와 같은 다른 검증 분석을 수행할 수 있습니다.

Click to view 1000+ citations
Click to view user testimonials

중점 사항

Permanent integration: 렌티바이러스 transduction은 호스트 세포 및 모든 자손의 게놈으로 안정적인 통합을 허용합니다.
Broad tropism: VSV-G pseudotyped 렌티바이러스는 대부분의 포유류 세포의 표면 수용체에 결합할 수 있어 타겟 세포의 효율적인 transduction을 촉진합니다.
Fast turnaround: 벡터 디자인부터 시작하여 빠르면 9주 만에 제작할 수 있습니다.

서비스 상세

Workflow for gene overexpression stable cell line engineering

Figure 1. 유전자 과발현 안정 세포주 제작의 일반적인 워크플로우.

가격 및 소요시간

Service Type	Deliverable	Price (USD)^*	Turnaround
Gene overexpression	Mixed pool (>10⁶ cells/vial, 2 vials)	From $2,999	9-15 weeks
Gene overexpression	Two single clones (>10⁶ cells/vial, 2 vials per clone)	From $3,999	14-20 weeks

* Additional charge will apply for extra single clones or vials.

QC assays

Assays	Methods
Overexpression validation (default）	RT-qPCR
Expression test (add-on)	WB, IF, FACS
Sterility (default)	PCR for mycoplasma detection, bioburden test for sterility detection

다운스트림 서비스

VectorBuilder는 proliferation, apoptosis, migration, viability, cytotoxicity 등에 대한 분석을 포함하여 제작된 세포주의 다양한 phenotype 평가 및 기능 검증을 수행할 수 있습니다.

사례 연구

Validation of lentiviral-based gene overexpression

Figure 2. 유전자 과발현(OE) 세포주의 검증. (A) 각각 MSLN, B7-H3 및 CD19를 운반하는 렌티바이러스로 transduction된 ID8, CHO-K1 및 HEK293 세포의 외래유전자 발현을 flow cytometry로 분석했습니다. (B) WB에 의한 Caco-2 세포에서의 GOI의 단백질 발현 레벨, 및 (C) luciferase assay에 의한 MCF7 세포에서의 luciferase 과발현. (D) 마우스의 luciferase-expressing Renca cell line-derived xenograft를 이미지화하여 in vivo에서 종양 이동을 추적했습니다.

주문 방법

Request Design Support

View service proposal > Add service into shopping cart > Get quote or purchase now.

FAQ

What are the advantages and disadvantages of overexpression vs. gene knockin?

	Approach	Advantages	Disadvantages
Overexpression	Lentivirus	Technical simplicity	Random insertion
Knockin	CRISPR (RNP electroporation)	Targeted insertion	Multiple components required

What are the advantages and disadvantages in using lentiviral transduction over plasmid transfection?

	Advantages	Disadvantages
Lentiviral transduction	Genomic integration, permanent expression; Ease of target cell transduction	Lower carrying capacity (6.4 kb)
Plasmid transfection	High carrying capacity (27 kb)	Transient expression, plasmid will dilute after serial passages; Requires electroporation or other transfection process