배큘로바이러스 (Baculovirus Packaging)
재조합 배큘로바이러스는 곤충 세포와 포유류 세포 배양에 의한 재조합 단백질 발현에 널리 사용됩니다. 이는 특히 진핵 생물의 post-translational modification 유지가 중요한 진핵세포 재조합 단백질 발현을 위하여가장 다양하며 강력한 시스템입니다.
VectorBuilder는 titer, 순도, 생존력 및 일관성 측면에서 재조합 배큘로바이러스 생산 프로토콜을 크게 개선한 자체의 기술과 시약을 개발해왔습니다. 그 결과 고객의 배큘로바이러스 벡터 클로닝과 배큘로바이러스 패키징에 대한 요구를 만족시킴으로써 당사에 반복적으로 의뢰하는 고객들이 점점 많아지고 있습니다.
제공되는 배큘로바이러스 유형
- 배큘로바이러스 strain AcMNPV (Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus)
서비스 세부 사항
가격 및 소요 시간 Price Match
| Scale | Application | Titer | Volume | Price (USD) | Turnaround |
|---|---|---|---|---|---|
| Medium | Cell culture | >106 PFU/ml | 1 ml (10x100 ul) | $649 | 15-22 days |
| Large | >107 PFU/ml | $1,099 | 22-29 days |
PFU = Plaque forming units
결과물
| Your custom baculovirus |
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Free: control virus
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Control 바이러스
Control 배큘로바이러스 벡터는 맞춤형 바이러스의 생물학적 응용과 일치하도록 디자인되어, 레트로바이러스 transduction을 테스트하는데 사용됩니다. 예를 들어 맞춤형 바이러스가 유전자를 과발현하는 경우, 제공되는 control 바이러스는 EGFP control 배큘로바이러스 (EGFP 과발현 배큘로바이러스) 입니다. Control 바이러스에 대한 자세한 정보는 다음과 같습니다.
| 벡터 시스템 | Control 바이러스 벡터 이름 | Control 바이러스 벡터 ID |
|---|---|---|
| 배큘로바이러스 재조합 단백질 발현 시스템 | pBV-ITR-CMV>EGFP-ITR | VB010000-9306ded |
배송 및 보관
배큘로바이러스는 DPBS buffer에 용해 후 얼려서 드라이아이스와 함께 배송됩니다. 수령 즉시 장기보관을 위해 (최소 6개월 이상 안정) -80℃에서 보관해야 하며, 일주일 이내에 사용시에는 -20℃에 보관하여야 합니다. 배큘로바이러스의 유통기한은 약 1년입니다. 배큘로바이러스의 반복적인 동결-융해는 심각한 titer 감소를 초래할 수 있기 때문에 피하여야 합니다.
기술적인 정보
배큘로바이러스 생산 및 QC
배큘로바이러스를 제조제조하기 위하여 목적 유전자(GOI)를 포함하는 배큘로바이러스 transfer plasmid는 Tn7 transposase를 발현하는 helper plasmid와 함께 empty 배큘로바이러스 shuttle vector (bacmid)를 가진 박테리아 호스트로 co-transformation되어 재조합 bacmid를 생성하도록 합니다. 그 다음에 재조합 bacmid는 Sf9 cell에 transfection됩니다. 단기간 배양 후 바이러스 입자를 배지로부터 채취하고, sucrose cushion centrifugation으로 농축합니다. VectorBuilder는 qPCR 기반의 방법을 사용하여 배큘로바이러스의 titer를 측정합니다.
VectorBuilder에서 생산되는 각 배큘로바이러스에 대한 품질관리에는 titer 측정, 박테리아 및 fungi에 대한 무균 테스트, mycoplasma 검출 등이 있습니다. Transfer 벡터가 형광 단백질을 인코딩하는 경우, 해당 형광을 검출하기 위해 transduction 테스트를 수행합니다.
주문 방법
고객이 제공하는 배큘로바이러스 transfer plasmid나 재조합 bacmid를 사용하는 경우 시료 제출 가이드라인에 따라서 벡터를 보내주시기 바랍니다. 배송 지연이나 시료 손상을 방지하기 위해 당사의 가이드라인을 엄격히 따라 주시기 바랍니다. 모든 고객이 제공하는 시료는 VectorBuilder에 의해 의무적으로 QC를 거치며 각 품목에 대해 $100의 추가 요금이 부과될 수 있습니다. 고객이 제공한 시료가 QC를 통과할 때까지는 생산을 시작할 수 없음을 유의하시기 바랍니다.