Baculovirus Packaging

재조합 baculovirus는 곤충세포와 포유류 세포에서 재조합 단백질 발현에 널리 사용된다. 이는 특히 eukaryotic-specific post-translational modification의 유지가 중요한 진핵세포에서 재조합 단백질 발현 에 가장 강력한 시스템이다.

VectorBuilder는 titer, 순도, 생존성 및 일관성 측면에서 재조합 baculovirus 생산 프로토콜을 크게 개선한 독점 기술과 시약을 개발했다. 그 결과 baculovirus 벡터 클로닝과 baculovirus 패키징에 대한 니즈에 만족하여 당사에 반복적으로 의뢰하는 고객들이 많아지고 있다.

Types of baculovirus offered
  • Baculovirus strain AcMNPV (Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus)

Service Details

Price and turnaround
Scale Application Titer Volume Price (USD) Turnaround
Medium Cell culture >106 PFU/ml 1 ml (10x100 ul) $599 15-22 days
Large >107 PFU/ml $999 22-29 days

PFU = Plaque forming units

Deliverables
Your custom baculovirus

Free:control virus

  • Medium: >106 PFU/ml, 2x100 ul
  • Large: >106 PFU/ml, 2x100 ul
Control virus

Control baculovirus 벡터는 custom 바이러스의 생물학적 응용과 일치하도록 디자인되어, baculovirus transduction을 테스트하는데 사용된다. 예를 들어 custom 바이러스가 유전자를 과발현하는 경우, 제공되는 control virus는 EGFP baculovirus (baculovirus overexpressing EGFP)이다. Control virus에 대한 자세한 정보는 다음과 같다.

Vector system Control virus vector name Control virus vector ID
Baculovirus recombinant protein expression system pBV-EGFP VB010000-9305vtu
Shipping and storage

Baculovirus는 DPBS buffer에 저장되며, 드라이아이스로 배송된다. 수령 즉시, 장기보관을 위해서는 -80℃ (6개월 이상 안정 가능) 또는 1주일 이내에 사용할 경우는 -20℃에서 보관하여야 한다. Baculovirus의 유통기한은 약 1년이다. Baculovirus의 반복적인 동결-융해 사이클은 피하세요. 이는 상당한 titer 감소를 초래할 수 있기 때문이다.

Technical Information

Baculovirus production and QC

Baculovirus 제조를 위해, 목적 유전자(GOI)를 운반하는 baculovirus transfer plasmid는 Tn7 transposase를 발현하는 helper plasmid와 함께 empty baculovirus shuttle vector (bacmid)를 품고 있는 박테리아 호스트로 co-transformation되어 재조합 bacmid를 생성한다. 재조합 bacmid는 Sf9 cell에 transfection된다. 단기간 배양 후 바이러스 입자를 배지로부터 채취하고, sucrose cushion centrifugation으로 농축한다. 당사는 qPCR 기반 방식으로 baculovirus titer를 측정한다.

Baculovirus-img

VectorBuilder에서 생산되는 각 baculovirus에 대한 품질관리에는 titer 측정, 박테리아 및 fungi에 대한 무균 테스트, mycoplasma 검출 등이 있다. Transfer vector가 형광 단백질을 인코딩하는 경우, 바이러스로 세포에 transduction하고 해당 형광을 검출한다.

Technical documents
Certificate of Analysis (COA)

How to Order

Order both vector construction and virus packaging
Order virus packaging or your own vector

If customer-supplied baculovirus transfer plasmids or recombinant bacmids are used, please send them to us following the Materials Submission Guidelines. Please strictly follow our guidelines to set up shipment to avoid any delay or damage of materials. All customer-supplied materials undergo mandatory QC by VectorBuilder which may incur a $100 surcharge for each item. Please note that production may not be initiated until customer-supplied materials pass QC.