HiExpress™ Sleeping Beauty Transposase IVT mRNA
Sleeping Beauty 시스템은 transposon DNA와 transposase를 동시에 도입하는 비바이러스성 (non-viral) 전달 방식을 통해 게놈 통합 (genomic integration)을 가능하게 합니다. VectorBuilder의 HiExpress™ Sleeping Beauty Transposase IVT mRNA는 포유류 세포 내에서 높은 활성을 나타내도록 서열이 최적화된 transposase를 암호화하고 있어, 강력한 '절단 및 붙여넣기 (cut-and-paste)' 방식의 전위 (transposition)를 가능하게 합니다. 또한, 효율성을 더욱 높이기 위해 VectorBuilder는 개선된 공여체 (donor) 형태인 celDNA (closed-ended linear DNA)를 개발했습니다. 이 외에도, Vector Design Studio를 통해 Sleeping Beauty transposon plasmid를 직접 디자인하실 수도 있습니다.
주문 정보 Price Match
배송 및 보관
VectorBuilder의 IVT mRNA 제품은 1 mM sodium citrate buffer (pH 6.4)에, celDNA 제품은 nuclease-free water에 보관됩니다. 두 제품 모두 -80°C에서 최대 12개월까지 보관할 수 있습니다. 제품은 드라이아이스를 이용하여 배송되며, 반복적인 동결-융해 (freeze-thaw)는 피해야 합니다.
실험에 의한 검증
Figure 1. HiExpress™ Sleeping Beauty (SB) transposase IVT mRNA는 celDNA donor를 이용한 효율적인 전위 (Transposition)를 가능하게 합니다. Cell-free DNA 증폭으로 SB transposon celDNA (CMV>EGFP-T2A-Puro)를 준비한 후, HiExpress™ SB transposase IVT mRNA의 처리 유무 조건으로 HEK293T 세포에 transfection하였습니다. Transfection 72시간 후에, 세포를 분주 (split)하고 puromycin 선별 (selection) 과정을 진행하였습니다. 형광 현미경을 사용하여 EGFP 발현을 관찰했습니다.
Figure 2. HiExpress™ Sleeping Beauty Transposase IVT mRNA의 검증. Sleeping Beauty plasmid, pSB-CMV>EGFP를 HiExpress™ SB Transposase IVT mRNA 처리 유무 조건으로 HEK293T 세포에 transfection하였습니다. Transfection 24, 48, 72시간 후에 형광 현미경을 통해 EGFP 발현을 관찰하였으며 (A), flow cytometry를 이용하여 평균 형광 강도 (mean fluorescence intensity)를 정량 분석하였습니다 (B).
